Instrumental Analysis Division, Equipment Management Center

Creative Research Institution, Hokkaido University

アクセス/リンク/サイトマップ

Home > 分析項目 > アミノ酸組成分析

アミノ酸組成分析をご依頼の方へ分析進捗状況

《アミノ酸組成分析》

-もくじ-

分析の概要

分析項目

参考文献

 

使用機器

分析手法の比較

試料の調製方法

受付場所と申込方法

加水分解について

分析データ出力例

 

お問合せ:Tel. 011-706-3702 (武田)

 

 

 

お知らせ

分析手法の比較」というページができました。
アミノ酸組成分析をこれからご利用になる皆様は、こちらをご参考にお申込みになる分析項目をお選び下さい。

 

分析の概要

 

アミノ酸分析機を用いて、ニンヒドリンを用いたポストカラム発色法(1)の吸光により、タンパク質・ペプチドおよび生体試料中のアミノ酸の定量を行います。 ニンヒドリンを用いた自動分析法では、0.5~50nmolの範囲において吸光度(ピーク面積)とアミノ酸濃度との間に良い直線性が得られるため(2)、外部標準による1点校正で分析を行っています。

2011年4月よりNBD-Fによるプレカラム発色法を用いた高感度分析を開始いたしました。

1) タンパク質・ペプチドの組成を調べる
  目的のタンパクを秤量し加水分解を行う。分解して生じたアミノ酸を定量することにより組成を求める。
2) アミノ糖の存在を調べる
  目的のアミノ糖タンパクを秤量し加水分解を行う。分解して生じたアミノ糖(GlcNH2、GalNH2)を定量する。
3) タンパク質・ペプチドの量・純度を定量する
  組成既知のタンパクを秤量し加水分解を行う。
  分解して生じたアミノ酸を定量することによりタンパク質・ペプチドの量・純度を定量する。
4) 生体試料中の遊離のアミノ酸を測定する
  生体試料中のタンパク質成分を除き、遊離のアミノ酸成分のみにする(除タンパクのため、限界分子量5000 程度のフィルターを使う)。
  アミノ酸分析機を用いてアミノ酸成分を同定する。

 

 

分析項目

 

分析項目は標準分析、生体アミノ酸(遊離アミノ酸)分析、高感度分析、アミノ糖他の特殊分析(要相談)です。

分析の前処理としてタンパク質・ペプチド試料の加水分解等も有料で承ります。

 

分析項目
アミノ酸
標準分析
D, T, S, E, P, A, G, Cystine, V, M, I, L, Y, F, K, H, R
生体アミノ酸分析
D, Q, T, N, S, E, P, A, G, Cystine, V, M, I, L, Y, F, K, H, W, R, o-Phosphoserine, Taurine, o-Phosphoethanolamine, Urea, HyPro, Sarcosine, α-Aminoadiputic acid, Citrulline, α-Amino-n-butyric acid, Cystathionine, β-Ala, β-Aminoisobutyric acid, γ-Aminobutyric acid, Ethanolamine, NH4Cl, HyLys, Ornithine, 1-MeHis, 3-MeHis, Anserine, Carnosine
高感度分析
D, T, S, E, P, A, G, Cystine, V, M, I, L, Y, F, K, H, R
アミノ糖分析
GlcNH2, GalNH2
その他特殊分析
HyPro, HyLys, Trp, n-L 他、上記以外のアミノ酸で分析可能なもの

 

参考文献

 

  1. D. H. Spackman, W. H. Stein, S. Moore: Anal. Chem., 30, 1190 (1958).
  2. 池田水江, 青木光夫, 新宮平三, 浜野吉政: "アミノ酸分析計における各アミノ酸の定量性に関する検討", THE HITACHI SCIENTIFIC INSTRUMENT NEWS, 30, No.1(1987).
  3. S. Moore, W. H. Stein: "Methods in Enzymology", ed. by S. P. Colowick, N. O. Kaplan, Vol. 6, p. 819, Academic Press, New York (1963).
  4. T. A. Mahowald, E. A. Noltman, S. A. Kuby: J. Biol. Chem., 237, 1138 (1962)
  5. B. Penke, R. Fersnczi, K. Kovacs: Anal. Biochem., 60, 45 (1974).
  6. R. J. Shimpson, M. R. Neuberger, T. Y. Liu: J. Biol. Chem., 251, 1936 (1976)

(アミノ酸組成分析全般について)

  • 日本生化学会編: "生化学実験講座1 タンパク質の化学Ⅱ一次構造決定法", 東京化学同人
  • .安藤鋭郎, 伊勢村寿三, 成田耕造, 渡辺格:"タンパク質化学2 基礎", 共立出版.